PCR凈化實驗室裝修設計方案

2020-06-15 08:38 昆山清陽凈化系統(tǒng)工程有限公司

PCR凈化實驗室裝修設計方案，昆山清陽凈化工程是為實驗室工作人員搭建一個安全、環(huán)保、美觀、舒適、智能的實驗室，基因擴增實驗又稱PCR ，其特點是能將微量的DNA 大幅增加，PCR 是分子生物研究和實驗的常規(guī)方法，廣泛應用于微生物各個領域，例如：檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷，DNA 指紋、個體識別、親子鑒定以及法醫(yī)物證，動、植物檢疫，動物及其衍生產品的檢測，動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測，轉基因作物與轉基因微生物檢測等。  

一、 PCR凈化實驗室平面布局  

基因實驗室又稱PCR 實驗室，實驗室原則上分為4個單獨的工作區(qū)域，前兩去為擴增前區(qū)，后兩區(qū)為擴增后區(qū)。擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū)，即從試劑準備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū)，不得逆向流動。實驗室的氣流也應從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū)，不得逆向流動。各工作區(qū)域應設置緩沖間，  工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區(qū)應是分隔獨立的工作室，并有明顯的標志，各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連，需安裝物品傳遞窗。每個工作區(qū)域的頂部應安裝紫外燈，紫外燈的波長為254nm 安裝數量為每20㎡安裝一直40W 的紫外燈。  實驗室較為理想的布局模式為有一個專用走廊，試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和產物分析區(qū)很規(guī)范地排列在一起，前三個區(qū)各有一個緩沖間，可供換工作服和工作鞋使用，頂上可安裝一紫外燈。內實驗區(qū)域設為正壓或常壓狀態(tài)，緩沖間內設為負壓狀態(tài)（可上設一抽風裝置），使這三個區(qū)的空氣流向為有實驗區(qū)域內向外，緩沖間內通向內實驗室和走廊的門可安裝一種連鎖裝置，當一個門打開時，另一門必須處于關閉狀態(tài)，防止出現(xiàn)兩個門同時打開的情況。產物分析區(qū)可不設緩沖間，但應設為負壓狀態(tài)（裝一個排風扇即可），使空氣流向由外向內，以防止擴增產物對空氣流出。每一區(qū)域都須有明確的標記，工作按試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)至產物分析區(qū)單一流向進行，各區(qū)的儀器設備包括工作服、鞋、實驗記錄本和筆都必須專用。如果無法做到以上模式，以下基本要求必須做到：  

（1） 四個區(qū)域必須是相互獨立的。  

（2） 各區(qū)域的儀器設備及各種物品必須是專用的。  

（3） 各區(qū)完全獨立，緩沖間可有可無。如為一個區(qū)套一個區(qū)的模式，區(qū)間不能直通，應有緩沖間，供換工作服及鞋子用，并保證兩個區(qū)域間始終處于完全分隔狀態(tài)。  

（4） 產物分析區(qū)應安裝排風扇及其他抽風裝置，持續(xù)負壓。  

二、 各區(qū)功能及主要設備  

（1） 試劑準備區(qū)：擴增試劑的配置、分裝和保存。未設緩沖間的試劑儲存和準備區(qū)，工作區(qū)域為正壓。用于擴增的試劑應冰凍儲存。主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器、紫外燈。  

（2） 樣品制備區(qū):  實驗室樣品的混樣和測試樣品的制備。未設緩沖間時工作區(qū)域為負壓或減壓，可安裝排風系統(tǒng)。所有的器具在使用前應經過徹底清洗并消毒，防止交叉污染。主要設備有冰箱、生物安全柜（或潔凈工作臺、排風柜）、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴、上下水裝置、廢棄物容器、紫外燈。根據制備樣品的性質和要求決定操作臺是選用生物安全柜、潔凈工作臺還是排毒柜，如疾病控制中心、臨床醫(yī)學實驗室一般選用生物安全柜，植物轉基因、檢疫等可選用排毒柜樣品制備需要較高潔凈條件的選用潔凈工作臺。  

（3） 擴增區(qū)：PCR 擴增反應體系的配置和模板的加入，核酸擴增。未設緩沖間的擴增區(qū)，工作間區(qū)域為負壓或減壓，可安裝排風系統(tǒng)。加樣應在超凈工作臺（生物安全柜）內進行，超凈工作臺的氣流方向一選擇垂流式。核酸擴增設備、冰箱、潔凈工作臺、離心機、加樣器、廢棄物容器、紫外燈。  

（4） 擴增產物分析區(qū)：擴增產物的測定。未設緩沖間的擴增產物區(qū)，工作區(qū)域為負壓或減壓，用安裝排風系統(tǒng)。若實驗僅采用全自動擴增檢測儀  （如實時熒光定量PCR 儀），可將擴增區(qū)與擴增產物分析區(qū)合并為一個區(qū)。本區(qū)所使用的儀器設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴鍋等。  

三、 潔凈實驗室空條通風系統(tǒng)設計及壓力控制  

各個區(qū)域之間應具備單相的實驗工藝流、物流、人流和氣流，形成單相流程，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。  PCR 實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送、排風的比例以保證個實驗區(qū)的壓力要求。  

四、 無菌實驗室裝修

 實驗室的墻體，包括頂棚，應結構牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒、；地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。地面建議采用PVC 卷材地面或自流坪地面，整體性好，便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（≥800mm ）接縫需要小于2mm 。燈具要選取凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點。 在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內部安裝有紫外燈，供消毒用。在試劑準備區(qū)和樣品制備區(qū)還設置移動紫外燈，對實驗桌進行局部消毒。  試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染。  試劑和樣品通過機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和樣品在傳遞過程中不受污染（人物分流）。  

五、 注意問題  

（1） 幾個區(qū)域的大小設置情況，應該是試劑準備區(qū)、產物擴增區(qū)、擴增分析區(qū)、要小一些。樣品制備區(qū)應大一些。因為樣品制備室要防止一個生物安全柜和一個低溫冰箱。  

（2） 試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)設立緊急洗眼器，以備不時之需。  

（3） PCR 實驗室的結晶度可以根據用戶的實際使用情況和資金投入來設計。